{"id":155474,"date":"2019-05-28T10:00:22","date_gmt":"2019-05-28T10:00:22","guid":{"rendered":"http:\/\/blog.hannaservice.eu\/les-bases-de-la-spectrophotometrie\/"},"modified":"2022-10-10T12:11:59","modified_gmt":"2022-10-10T12:11:59","slug":"les-bases-de-la-spectrophotometrie","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/blog.hannaservice.eu\/fr\/les-bases-de-la-spectrophotometrie\/","title":{"rendered":"Les bases de la spectrophotom\u00e9trie"},"content":{"rendered":"\t\t
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La couleur est partout dans notre quotidien. Saviez-vous que vous pouvez r\u00e9ellement mesurer la couleur ? Le spectrophotom\u00e8tre est un outil essentiel pour les biologistes et les techniciens lors de l’analyse d’\u00e9chantillons chimiques et biologiques.<\/p>\n\t\t\t\t\t\t\t\t<\/div>\n\t\t\t\t\t<\/div>\n\t\t<\/div>\n\t\t\t\t\t<\/div>\n\t\t<\/section>\n\t\t\t\t

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Ce blog examinera les bases de la spectrophotom\u00e9trie et les diff\u00e9rentes configurations.<\/p>\n

Lumi\u00e8re et couleur<\/h2>\n

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Lumi\u00e8re visible<\/figcaption><\/figure>\n

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En termes simples, les couleurs d\u00e9pendent de la lumi\u00e8re. Nous ne voyons pas r\u00e9ellement les couleurs mais plut\u00f4t ce que nous voyons comme couleur, c\u2019est l\u2019effet de la lumi\u00e8re qui brille sur un objet. Lorsque la lumi\u00e8re blanche brille sur un objet, il peut \u00eatre r\u00e9fl\u00e9chi, absorb\u00e9 ou transmis. Le verre transmet la majeure partie de la lumi\u00e8re qui entre en contact avec lui, il appara\u00eet donc incolore. La neige refl\u00e8te toute la lumi\u00e8re et appara\u00eet blanche. Un tissu noir absorbe toute la lumi\u00e8re et appara\u00eet ainsi noir. Un morceau de papier rouge refl\u00e8te mieux la lumi\u00e8re rouge que les autres couleurs. La plupart des objets apparaissent color\u00e9s car leur structure chimique absorbe certaines longueurs d\u2019onde de la lumi\u00e8re et en r\u00e9fl\u00e9chit d\u2019autres.<\/p>\n

Lorsque nous parlons de lumi\u00e8re, nous parlons g\u00e9n\u00e9ralement de lumi\u00e8re blanche. Une mince ligne de lumi\u00e8re s\u2019appelle un rayon; un faisceau est compos\u00e9 de nombreux rayons de lumi\u00e8re. Lorsque la lumi\u00e8re blanche passe \u00e0 travers un prisme (objet transparent triangulaire), les couleurs qui composent la lumi\u00e8re blanche se dispersent en sept bandes de couleurs. Ces bandes de couleur sont appel\u00e9es spectre. Sept couleurs constituent la lumi\u00e8re blanche: rouge, orange, jaune, vert, bleu, indigo et violet. Dans tout spectre, les bandes de couleur sont toujours organis\u00e9es dans cet ordre de gauche \u00e0 droite.<\/p>\n

Supposons que nous projetions un faisceau de lumi\u00e8re blanche sur une substance absorbant la lumi\u00e8re bleue. Comme la composante bleue de la lumi\u00e8re blanche est absorb\u00e9e par la substance, la lumi\u00e8re transmise est principalement jaune, la couleur compl\u00e9mentaire du bleu. Cette lumi\u00e8re jaune atteint nos yeux et nous \u00abvoyons\u00bb la substance comme une substance de couleur jaune.<\/p>\n

La variation de couleur d\u2019un syst\u00e8me qui subit un changement de concentration de certains composants constitue la base de l\u2019analyse colorim\u00e9trique.<\/p>\n

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Analyse colorim\u00e9trique<\/figcaption><\/figure>\n

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Qu\u2019est-ce que la colorim\u00e9trie?<\/h2>\n

La colorim\u00e9trie est simplement la mesure de la couleur. La colorim\u00e9trie est la d\u00e9termination de la concentration d\u2019une substance en mesurant l\u2019absorption relative de la lumi\u00e8re par rapport \u00e0 une concentration connue de la substance. En colorim\u00e9trie visuelle, la lumi\u00e8re blanche naturelle ou artificielle est g\u00e9n\u00e9ralement utilis\u00e9e comme source de lumi\u00e8re et les d\u00e9terminations sont g\u00e9n\u00e9ralement effectu\u00e9es \u00e0 l\u2019aide d\u2019un simple instrument appel\u00e9 colorim\u00e8tre ou comparateur de couleur. Lorsque l\u2019\u0153il est remplac\u00e9 par une cellule photo\u00e9lectrique, l\u2019instrument est appel\u00e9 colorim\u00e8tre photo\u00e9lectrique.<\/p>\n

Une analyse colorim\u00e9trique repose sur le principe selon lequel de nombreuses substances r\u00e9agissent entre elles et forment une couleur qui peut indiquer la concentration de la substance \u00e0 mesurer. Lorsqu\u2019une substance est expos\u00e9e \u00e0 un faisceau d\u2019intensit\u00e9 lumineuse (I\u2080), une partie du rayonnement est absorb\u00e9e par les mol\u00e9cules de la substance et un rayonnement d\u2019intensit\u00e9 (I) est \u00e9mis. Cette diff\u00e9rence d\u2019intensit\u00e9 est utilis\u00e9e pour la d\u00e9termination colorim\u00e9trique.<\/p>\n

La quantit\u00e9 de rayonnement absorb\u00e9e est donn\u00e9e par la loi de Beer-Lambert:<\/p>\n

A = \u0190 \u00b7 l \u00b7 C<\/p>\n

O\u00f9:<\/p>\n